(Direct Examination)
亦稱「先詰問」、「直接詰問」。行交互詰問時，證人或鑑定人先由聲請傳喚之當事人、代理人或辯護人詢問，叫做「主詰問」。
主詰問應就待證事項及其相關事項行之。而為辯明證人、鑑定人記憶及陳述之正確性，或證人、鑑定人的可信性等（憑信性）﹐也可以就必要事項為主詰問。
另外，就實務經驗而言，由當事人、代理人、辯護人或輔佐人聲請傳喚的證人、鑑定人，一般是有利於該造當事人之友性證人。
因此，若行主詰問者為誘導詰問，證人很有可能迎合主詰問者的意思，而做非真實的陳述。因此，原則上在行主詰問時不得為誘導詰問，但是為發見真實之必要或無導出虛偽供述之危險 時，則例外允許於行主詰時，為誘導詰問。
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